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CAR-T細胞培養(yǎng)基N109-1000
專門為體外培養(yǎng)和擴增外周血來源或經(jīng)純化分離得來的人T細胞而研發(fā),適用于人 CAR-T細胞的體外培養(yǎng)和擴增。本產(chǎn)品為無異源性組份培養(yǎng)基,無動物源性成份、不含異源蛋白,僅含有微量的重組轉鐵蛋白和少量人白蛋白(<0.15%)。其中,人白蛋白成份已參考FDA指南進行包括 HIV1/HIV2、HBV、HCV 和 Syphilis 等的檢測,結果均為陰性。
CAR-T細胞培養(yǎng)基N109-1000
該培養(yǎng)基專門為體外培養(yǎng)和擴增外周血來源或經(jīng)純化分離得來的人T細胞而研發(fā),適用于人 CAR-T細胞的體外培養(yǎng)和擴增。
特點:本品為即用型培養(yǎng)基,在實際使用過程中可根據(jù)需要自行添加生長因子或抗體等。
儲存方法:2-8℃,避光保存。
應用:用于從人外周血單個核細胞(PBMC)或純化分離T細胞制備CAR-T 細胞的培養(yǎng)或擴增。
使用說明:
從外周血PBMC擴增活化CAR-T細胞:
Day 1-3
1.將新鮮分離或凍存復蘇的人外周血單個核細胞(PBMC),按照2X106cells/mL的濃度,懸于Nobimpex N108或N109培養(yǎng)基中。按1ml/孔將細胞添加到24孔板中。
2.將Human T-Activator CD3/CD28磁珠以與細胞1:1的比例(約12.5-18.75μl beads)添加到細胞中。
3.添加終濃度300μL/mL的IL-2。將細胞放置于37℃、5%CO細胞培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
Day 4-5
4.重調整細胞濃度至0.5-1.0X106cells/mL,加入CAR轉染病毒(MOI:1-5),混勻,繼續(xù)培養(yǎng)。
Day6-8
5.收集細胞進行分析或后續(xù)實驗。
6.如需進一步擴大活化的T細胞數(shù)量,可以繼續(xù)用Human T-Activator CD3/CD28磁珠和重組人IL-2重新活化細胞。重復步驟1-4。
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